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多西环素对培养的人结膜上皮细胞炎性反应及凋亡的影响

  为了探讨多西环素对体外培养的人结膜上皮细胞细胞黏附分子1(ICAM-1,CD54)、人类白细胞抗原DR (HLA-DR)、白细胞介素1β(IL-1β)表达及凋亡的影响。研究者混合消化液培养法培养人结膜上皮细胞,免疫组织化学方法进行细胞鉴定。培养至第3代或第4代,在细胞培养液中分别加入γ干扰素(IFN-γ)0 U/ml、IFN-γ 300 U/ml、IFN-γ 300U/ml+多西环素10μg/ml、IFN-γ300U/ml+多西环素20μg/ml、IFN-γ300U/ml+多西环素40μg/ml、IFN-γ 300U/ml+地塞米松100μg/ml,24h后收集细胞,流式细胞学检测CD54、HLA-DR及IL-1β的表达,Western blot检测CD54的表达。72h后收集细胞,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞学检测凋亡。结果培养的正常人结膜上皮细胞可以表达少许CD54和IL-1β,加入IFN-γ后表达明显增加,加入多西环素和地塞米松后CD54和IL-1β的表达下降(P<0.01)。随着所加多西环素浓度的增加,CD54和IL-1β的表达逐渐降低(P<0.01)。培养的正常人结膜上皮细胞未发现明显的HLA-DR的表达及凋亡的产生,加入IFN-γ及多西环素后HLA-DR的表达及凋亡水平无明显变化(P>0.05)。可见多西环素可抑制培养的正常人结膜上皮细胞CD54和IL-1β等炎性相关因子的产生,提示多西环素对干眼等非感染性眼表炎性疾病的治疗可能具有一定的应用前景。

中华眼科杂志
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